小鼠β防御素1与甲型流感病毒M2e融合基因表达及其免疫特性研究

• 作者: 丰锋 左斌 巩天祥 张强 李婉宜 李明远 王保宁
• 来源期刊: 中国人兽共患病学报
• 学科: 医学
• 关键词: 甲型流感病毒 β防御素 融合基因 重叠延伸PCR 免疫荧光
• 年，卷（期）: 2010,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 299-303
• 页数: 5页
• 分类号: R373.3
• 字数: 3729字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.2010.04.002

摘要

目的 构建mBD1与M2e融合基因的真核表达载体,并检测其在MDCK细胞中的表达情况,初步探讨其免疫特性.方法 利用PCR方法分别扩增mBD1与M2e基因片段,再通过重叠延伸PCR技术(SOE-PCR)将mBD1与M2e通过一段多肽接头Gly4Ser连接为融合基因mBD1-M2e.将该融合基因插入真核表达载体pcDNA3.1(+)获得重组质粒pcDNA3.1(+)/mBD1-M2e,经酶切、PCR及测序鉴定正确后,用脂质体转染MDCK细胞,通过免疫荧光、RT-PCR产物序列分析检测融合蛋白表达情况,最后采用MTT法检测mBD1-M2e融合蛋白刺激淋巴细胞增殖能力.结果 经鉴定后证实构建真核表达质粒pcDNA3.1(+)/mBD1-M2e正确,该重组质粒能在MDCK细胞中稳定表达,该细胞培养上清液能刺激淋巴细胞增殖.结论 本研究成功构建mBD1-M2e融合基因的真核表达质粒,并证实其融合蛋白能在MDCK细胞中稳定表达,这一结果为进一步研究新型高效通用的流感病毒核酸疫苗奠定了坚实的基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张强	四川大学华西基础医学与法医学院微生物室	129	994	17.0	24.0
3	李婉宜	四川大学华西基础医学与法医学院微生物室	43	207	7.0	12.0
4	丰锋	四川大学华西基础医学与法医学院微生物室	4	2	1.0	1.0
5	巩天祥	四川大学华西基础医学与法医学院微生物室	2	1	1.0	1.0
8	左斌	四川大学华西基础医学与法医学院微生物室	6	18	3.0	4.0
9	王保宁	四川大学华西基础医学与法医学院微生物室	14	34	3.0	4.0