重组人干扰素λ1的表达、纯化及生物活性研究

• 作者: 张钫 张骞 王翔 薛鹏浩 袁武梅 郑丽舒 麻粉莲
• 来源期刊: 生物技术通讯
• 学科: 生物学
• 关键词: 重组人干扰素λ1 表达 纯化 抗病毒活性 抗增殖活性
• 年，卷（期）: 2010,（3）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 310-314
• 分类号: Q78
• 字数: 4577字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-0002.2010.03.003

摘要

目的:利用大肠杆菌系统表达重组人Ⅲ型干扰素λ1(rhIFN-λ1),并进行纯化,以比较其与重组人干扰素-α2b(rhIFN-α2b)生物学活性的差异.方法:密码子优化的rhIFN-λ1基因与pET-44a载体连接构建原核表达质粒,在大肠杆菌BL21(DE3)中表达,表达产物经系列层析纯化;采用细胞病变抑制法比较纯化的rhIFN-λ1与rhIFN-α2b、市售rhIFN-λ1的抗病毒活性;采用MTS法比较这些干扰素的抗肿瘤细胞增殖活性.结果:基因优化后的rhIFN-λ1在大肠杆菌中得以高效表达,用所建立的纯化工艺可制备得到纯度达95.7%的rhIFN-λ1;rhIFN-λ1的抗病毒比活性为3.2×105 U/mg,比市售rhIFN-λ1的比活性(1.1×105 U/mg)略高,抗肿瘤细胞增殖活性为rhIFN-α2b的1.7倍.结论:获得的rhIFN-λ1具有剂量依赖的抗病毒活性和抗增殖活性,其抗病毒活性比市售rhIFN-λ1略高,抗细胞增殖活性高于rhIFN-α2b,提示rhIFN-λ1有较大的应用前景.