甲型副伤寒杆菌ompA基因分布及重组表达产物的免疫学鉴定

• 作者: 丁威 严杰 孙爱华 毛亚飞 蒋锦琴 阮萍
• 来源期刊: 中华微生物学和免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 甲型副伤寒杆菌 ompA基因 重组表达 免疫原性 免疫保护性
• 年，卷（期）: 2010,（1）
• 所属期刊栏目: 细菌学
• 页码范围: 1-5
• 页数: 5页
• 分类号: R3
• 字数: 3559字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0254-5101.2010.01.001

摘要

目的 构建甲型副伤寒杆菌ompA基因原核表达系统,确定其重组表达产物rOmpA免疫原性和保护作用,检测甲型副伤寒杆菌临床菌株ompA基因携带率.方法 采用PCR从甲型副伤寒杆菌临床株JH01中扩增ompA基因,T-A克隆后测序并构建ompA基因原核表达系统.采用SDS-PAGE和Bio-Rad凝胶图像分析系统检测rOmpA表达情况及其产量,采用免疫扩散法、微量肥达试验和Western blot鉴定其抗原性和免疫反应性.采用PCR检测98株甲型副伤寒杆菌临床菌株ompA基因携带率.采用小鼠感染模型,了解rOmpA对甲型副伤寒杆菌50001株感染的免疫保护作用.结果 与报道的相关序列比较,所克隆的ompA基因核苷酸和氨基酸序列相似性均为100%.rOmpA表达量约为细菌总蛋白的65%.rOmpA能与其兔抗血清和甲型副伤寒杆菌全菌抗血清产生免疫反应(Western blot),并可在家兔中诱导产生抗体.94.9%(93/98)甲型副伤寒杆菌临床菌株含有ompA基因.100 μg和200 μg rOmpA对感染小鼠的免疫保护率分别为41.7%(5/12)和58.3%(7/12).rOmpA免疫小鼠或保护试验存活小鼠血清对各副伤寒杆菌H抗原的凝集效价为1:5～1:40.结论 ompA基因在甲型副伤寒杆菌临床菌株中分布广泛.rOmpA有良好的免疫原性和一定的免疫保护作用,可考虑为甲型副伤寒杆菌基因工程疫苗候选抗原.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	孙爱华		112	523	11.0	15.0
2	严杰	浙江大学医学院病原生物学系	265	1149	14.0	20.0
3	毛亚飞	浙江大学医学院病原生物学系	41	232	9.0	12.0
4	阮萍	浙江绍兴文理学院医学院医学检验系	2	12	2.0	2.0
5	丁威		6	27	3.0	5.0