家蝇Cecropin基因的原核表达及表达产物的免疫学鉴定

• 作者: 王炜 郑学礼
• 来源期刊: 中国人兽共患病学报
• 学科: 医学
• 关键词: 家蝇 Cecropin 多克隆抗体 融合表达
• 年，卷（期）: 2009,（5）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 439-441,445
• 页数: 4页
• 分类号: R384.2
• 字数: 2820字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.2009.05.010

摘要

目的 克隆家蝇抗菌肽基因Cecropin A,进行原核表达,制备兔抗家蝇幼虫血清鉴定表达产物.方法 在GenBank中检索家蝇Cecropin A基因序列, 设计特异性引物, 从家蝇幼虫组织总RNA中RT-PCR扩增Cecropin A成熟肽(Mature Cecropin,MC)基因, 克隆入原核表达载体pET32a中,并转化大肠埃希菌BL21 (DE3).经异丙基-β-D硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达, 十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析重组蛋白.用家蝇幼虫匀浆液免疫家兔,获得多抗血清,双向琼脂扩散实验鉴定多克隆抗血清的效价.Western blotting 鉴定纯化后的重组蛋白质.结果 重组蛋白质Thioredoxin(硫氧还蛋白,Trx)-MC,经兔抗家蝇幼虫血清鉴定正确.结论 天然MC在原核表达系统中得到正确表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	郑学礼	南方医科大学公共卫生与热带病学院病原生物学系	50	159	7.0	9.0
2	王炜	南方医科大学公共卫生与热带病学院病原生物学系	4	13	3.0	3.0