新孢子虫NcGRA2t基因的原核表达及鉴定

• 作者: 于龙政 张守发 金春梅
• 来源期刊: 中国兽医杂志
• 关键词: 新孢子虫 NcGRA2t 原核表达
• 年，卷（期）: 2015,（4）
• 所属期刊栏目: 实验观察
• 页码范围: 33-34,38
• 页数: 3页
• 分类号: S852.72+3
• 语种: 中文

摘要

为研究新孢子虫GRA2t基因的原核表达及其表达产物的免疫活性,用EcoRI和XhoI限制性内切酶从pMD20-NcGRA2t上切下NcGRA2t基因,克隆入pGEX-4T1中构建NcGRA2t-GST融合蛋白基因的重组表达载体pGEX-4T1-Nc-GRA2t.经测序验证后,在大肠杆菌BL-21 (DE3)中诱导表达,表达产物采用谷胱甘肽-琼脂糖层析柱进行纯化.用Western blotting方法,以犬感染新孢子虫Nc1株的血清鉴定表达产物的活性.结果,构建了pGEX-4T1-NcGRA2t原核表达质粒,并在大肠杆菌BL-21(DE3)中诱导表达分子量为46 ku的NcGRA2t-GST融合蛋白,表达产物经谷胱甘肽-琼脂糖层析柱纯化后,得到N端带有GST标签的NcGAR2t蛋白.Western blotting结果显示,表达产物具有生物学活性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	金春梅	延边大学农学院	34	68	5.0	7.0
2	张守发	延边大学农学院	147	901	14.0	24.0
3	于龙政	延边大学农学院	51	89	5.0	6.0