新孢子虫NcSRS2基因的亚克隆和表达

• 作者: 余劲术 刘群 汪明
• 来源期刊: 中国兽医杂志
• 关键词: 犬新孢子虫 NcSRS2基因 亚克隆 表达
• 年，卷（期）: 2006,（4）
• 所属期刊栏目: 调查研究
• 页码范围: 3-6
• 页数: 4页
• 分类号: Q786
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0529-6005.2006.04.001

摘要

本研究根据NcSRS2基因序列设计合成一对引物,将上、下游引物分别引入EcoRI,XhoI酶切位点,用PCR技术从pGEX-NcSRS2重组质粒扩增截去N端疏水氨基酸序列NcSRS2的基因片段(以下称dNcSRS2),插入到pGEX-6p-1质粒的多克隆位点,转化大肠杆菌BL21感受态细胞,于氨苄阳性LB培养平板上筛选阳性克隆,酶切及PCR鉴定;经IPTG诱导在E.coli中表达,用SDS-PAGE和免疫印迹分析表达产物并纯化.结果表明,新孢子虫dNcSRS2基因体外扩增产物与预期值相符,约1041bp;所构建pGEX-dNcSRS2重组质粒经双酶切与PCR鉴定,与预期结果一致;SDS-PAGE和免疫印迹显示,表达融合蛋白的分子量约为62.6 kD,表达效率为32.3%,该蛋白具有特异的免疫反应性,为新孢子虫病诊断试剂盒的研制和疫苗的研制奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	汪明	中国农业大学动物医学院	260	2264	23.0	31.0
2	余劲术	中国农业大学动物医学院	2	21	2.0	2.0
4	刘群	中国农业大学动物医学院	64	836	17.0	27.0