表达牛源犬新孢子虫NcSRS2基因重组腺病毒的构建及免疫原性分析

• 作者: 于龙政 张守发 贾立军
• 来源期刊: 畜牧兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 牛 犬新孢子虫 NcSRS2基因 重组腺病毒 免疫原性
• 年，卷（期）: 2012,（3）
• 所属期刊栏目: 预防兽医
• 页码范围: 446-452
• 分类号: S852.723
• 字数: 3211字
• 语种: 中文

摘要

为构建牛源犬新孢子虫NcSRS2基因重组腺病毒,并分析其免疫原性,PCR扩增牛源犬新孢子虫NcSRS2基因,构建克隆质粒pMD18-T-NcSRS2、重组腺病毒穿梭质粒pCR259-NcSRS2及表达质粒Transpose-AdNcSRS2,脂质体介导转染QBI-HEK293细胞,包装重组腺病毒Ad5-NcSRS2,PCR检测重组腺病毒NcSRS2基因,IFAT和Western blotting检测NcSRS2基因在QBI-HEK293细胞中的表达,测定病毒滴度后,收集病毒液免疫BALB/c小鼠,间接ELISA检测小鼠血清IgG抗体水平.结果显示,扩增的牛源犬新孢子虫NcSRS2基因大小为1 227 bp,与GenBank中发表的NcSRS2( AF061249)核苷酸序列相似性为99％；重组腺病毒Ad5-NcSRS2在293细胞中包装成功,表达蛋白的相对分子质量为43 ku,具有较好的反应原性；测得重组腺病毒Ad5-NcSRS2滴度为109TCID50·mL-1,间接ELISA检测二免后3周BALB/c小鼠血清中IgG抗体效价达1 ∶ 2 048.本研究成功构建了具有良好免疫原性的重组腺病毒Ad5-NcSRS2,为牛源犬新孢子虫NcSRS2基因重组腺病毒载体疫苗的研制奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	贾立军	延边大学农学院	111	293	9.0	10.0
2	张守发	延边大学农学院	147	901	14.0	24.0
3	于龙政	延边大学农学院	51	89	5.0	6.0