南阳牛BoLA-DRA基因的克隆及其在大肠埃希菌中的表达

• 作者: 张彦明 徐照学 施巧婷 楚秋霞 陆涛峰
• 来源期刊: 动物医学进展
• 学科: 生物学
• 关键词: 南阳牛 BoLA-DRA pGEX-4T-1 原核表达
• 年，卷（期）: 2010,（6）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 5-10
• 分类号: Q785
• 字数: 3842字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-5038.2010.06.002

摘要

为克隆南阳牛BoLA-DRA基因,构建原核表达载体并研究该基因在大肠埃希菌中的表达.从南阳牛脾脏组织中提取总RNA,利用RT-PCR方法扩增得到BoLA-DRA基因,将其克隆至pGEM-T easy克隆载体上,转化感受态细胞DH 5a,经测序鉴定后,进一步亚克隆至原核表达载体pGEX-4T-1中,构建出重组表达质粒,经IPTG诱导表达.结果表明,本试验成功克隆了大小为917 bp的BoLA-DRA基因,重组质粒pGEX-4T-DRA在大肠埃希菌中以包涵体形式表达,表达产物经SDS-PAGE和Western blot鉴定大小为54.4 ku,与预期结果一致.为进一步研究该蛋白的功能及制备抗体奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	徐照学	河南省农业科学院畜牧兽医研究所	111	274	8.0	11.0
2	张彦明	西北农林科技大学动物医学院	256	1530	16.0	24.0
3	施巧婷	河南省农业科学院畜牧兽医研究所	46	142	6.0	9.0
4	楚秋霞	西北农林科技大学动物医学院	15	42	3.0	5.0
8	陆涛峰	河南省农业科学院畜牧兽医研究所	1	2	1.0	1.0