甲型H1N1流感病毒HA基因的原核表达及免疫反应性分析

• 作者: 李晓波 游猛 潘志明 焦新安 耿士忠 顾健 马全刚 黄金林
• 来源期刊: 中国人兽共患病学报
• 学科: 医学
• 关键词: 甲型 H1N1 流感病毒 血凝素 原核表达 免疫反应性
• 年，卷（期）: 2010,（10）
• 页码范围: 923-925,948
• 分类号: R373
• 字数: 3830字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.2010.10.009

摘要

目的 构建甲型H1N1流感病毒HA基因的原核表达质粒,获得融合表达蛋白,并对表达蛋白的免疫反应性进行分析.方法 人工合成A/California/05/2009 H1N1流感病毒的HA基因,以合成基因为模板,通过PCR方法 扩增出去除信号肽的HA部分基因片段,然后将去除信号肽的HA基因克隆至pET30a(+)原核表达载体中,构建出原核表达质粒,再将重组质粒转化E.coli BL21(DE3)表达菌株;重组菌经IPTG诱导后,收集菌体进行SDS-PAGE电泳分析,Western blot分析表达产物的免疫反应性.结果 获得了HA基因的原核表达重组菌,细菌经IPTG诱导表达后,SDS-PAGE分析可见约67.4 ku大小的目的 蛋白表达条带,Western blot结果 显示,表达产物与人甲型H1N1流感患者阳性血清具有反应性.结论 成功表达出甲型H1N1流感病毒的HA蛋白,该蛋白具有良好的免疫反应性,为甲型H1N1流感的快速诊断方法 的建立提供了生物材料.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	潘志明	扬州大学江苏省人兽共患病学重点实验室	163	1328	20.0	28.0
2	李晓波		35	223	8.0	14.0
3	耿士忠	扬州大学江苏省人兽共患病学重点实验室	38	211	9.0	13.0
4	黄金林	扬州大学江苏省人兽共患病学重点实验室	115	959	16.0	26.0
5	顾健		75	189	7.0	9.0
6	游猛	扬州大学江苏省人兽共患病学重点实验室	3	27	3.0	3.0
7	马全刚	扬州大学江苏省人兽共患病学重点实验室	2	23	2.0	2.0