人源性甲型流感病毒(H1N1)分离株血凝素生物学特征分析

• 作者: 何太平 王华洪 袁丹
• 来源期刊: 实用预防医学
• 学科: 医学
• 关键词: A型流感病毒 病毒分离 HA 生物学特征
• 年，卷（期）: 2010,（12）
• 页码范围: 2386-2388
• 分类号: R373.1+3
• 字数: 2857字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1006-3110.2010.12.015

摘要

目的 分离人甲型H1N1流感病毒,探讨血凝素基因的生物学特征.方法 采集流感患者鼻咽分泌物,MDCK细胞进行病毒分离,血凝抑制实验测定病毒滴度,提取病毒总RNA,设计特异性引物,RT-PCR扩增HA基因ORF开放阅读框cDNA,克隆到pUCm-T载体,转化大肠杆菌xL1-Blue,经蓝白斑筛选阳性克隆,PCR鉴定后进行基因序列测定,通过生物信息学软件对HA的基因组结构和生物学特征进行分析.结果 通过MDCK细胞培养成功分离出人甲型H1N1流感病毒,并于接种后24 h出现CPE,第二代病毒培养物滴度为256;成功扩增出产物大小为1 701 bp的H1N1流感病毒HA基因;构建了pUCm-T/HA载体并测序成功;BLAST结果显示与A/California/04/2009(H1N1)病毒株核苷酸与氨基酸同源性均为99%,所分离的毒株包含20种566个氨基酸.结论 甲型H1N1流感病毒的分离和HA基因的测序,为后续HA蛋白的功能学研究奠定了坚实基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	何太平		44	353	10.0	17.0
2	王华洪		7	39	3.0	6.0
3	袁丹		4	14	2.0	3.0