人粒-巨噬细胞集落刺激因子和结核杆菌特异性抗原CFP10嵌合基因重组卡介苗的构建及鉴定

• 作者: 杨晓玲 邓仪昊 鲍朗
• 来源期刊: 中国人兽共患病学报
• 学科: 医学
• 关键词: GM-CSF CFP10 卡介苗 穿梭质粒
• 年，卷（期）: 2010,（9）
• 页码范围: 795-798,804
• 分类号: R392.11
• 字数: 3256字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.2010.09.001

摘要

目的 构建能共同表达人粒-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)和结核分枝杆菌培养滤液蛋白10(CFP10)的重组卡介苗(recombinant BCG, rBCG).方法 运用分子克隆技术,通过SOE法(重叠延伸,Gene splicing by overlap extension),扩增GMCSF-CFP10嵌合基因,将该基因定向克隆到穿梭表达质粒pMV361中,构建重组pMV GMCSF-CFP10质粒.用电穿孔法将重组质粒导入BCG菌构建rBCG,经热诱导后对rBCG表达产物作SDS-PAGE及免疫印迹分析.结果 重组质粒pMVGMCSF-CFP10经PCR、酶切及测序证实构建成功,并在BCG中经热诱导成功表达了具有GMCSF-CFP10的嵌合蛋白.结论 成功构建能表达GMCSF-CFP10蛋白的重组BCG,为发展新型结核病疫苗奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	鲍朗	四川大学华西医学中心感染免疫研究室	84	212	7.0	10.0
2	邓仪昊	四川大学华西医学中心感染免疫研究室	15	34	4.0	5.0
3	杨晓玲	四川大学华西医学中心感染免疫研究室	15	73	6.0	8.0