猪圆环病毒2型cap基因与猪γ-干扰素基因双表达载体的构建及稳定表达

• 作者: 兰喜 娄忠子 李学瑞 李宝玉 李志勇 杨彬 柳纪省 殷相平
• 来源期刊: 畜牧与兽医
• 学科: 农学
• 关键词: 猪圆环病毒2型 核衣壳蛋白 猪γ-干扰素 双表达载体 抗性筛选
• 年，卷（期）: 2010,（12）
• 页码范围: 67-72
• 分类号: S855.3
• 字数: 5099字
• 语种: 中文

摘要

通过PCR方法分别从含有猪圆环病毒2型(PCV-2)核衣壳蛋白(Cap)基因和猪γ-干扰素(PoIFN-γ)基因的重组克隆载体pMD18-PCV-2Cap和pMD18-PoIFN-y中扩增出Cap和PoIFN-γ的基因,将两基因亚克隆到真核表达载体pBudCE4.1中,构建重组真核双表达载体pBud-IFNPCV.重组质粒转染BHK-21细胞后进行ZeocinTM抗性筛选建立细胞系,阳性细胞通过间接免疫荧光(IFA)和Western blot检测cap和PoIFN-y在BHK-21细胞中的表达.结果显示,试验中筛选出1株ZeocinTM抗性阳性BHK-21细胞,cap和PoIFN-γ均在该细胞中获得稳定高效表达,这将为猪圆环病毒病的防治提供新的方法.