SH2D4A互作蛋白的筛选及初步鉴定

• 作者: 刘洪 李伟 李婷婷 赵彦艳
• 来源期刊: 遗传
• 学科: 生物学
• 关键词: SH2D4A 酵母双杂交技术 GST pull-down 蛋白质相互作用 SH2结构域
• 年，卷（期）: 2010,（7）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 712-718
• 分类号: Q5
• 字数: 4450字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3724/SP.J.1005.2010.00712

摘要

SH2D4A 是SH2蛋白家族成员之一,可能参与酪氨酸蛋白激酶相关受体介导的信号转导,调节细胞的生长、增殖和分化,进而影响人类疾病的发生.文章运用酵母双杂交技术筛选SH2D4A相互作用蛋白,并利用酵母交配(mating)实验和GST pull-down实验进行了初步鉴定.首先成功构建了酵母诱饵蛋白重组表达载体pGBKT7-SH2D4A;利用该重组体对人肾脏cDNA文库进行逐级筛选,共得到46个阳性克隆;经目的基因的分离、DNA测序及BLAST软件对序列进行比对分析,发现5种可能的SH2D4A互作蛋白(AZGP1、DAD1、HSD17810、KAT5和PKM2);NetPhos 2.0 Server软件预测结果显示除HSD17810外其他4种蛋白均含有磷酸化酪氨酸;进一步以KAT5和HSD17810作为代表进行了酵母交配和GST pull-down,证实两者均可直接结合SH2D4A.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	赵彦艳	中国医科大学医学遗传学教研室	79	277	9.0	13.0
2	刘洪	中国医科大学医学遗传学教研室	8	8	2.0	2.0
3	李婷婷	中国医科大学医学遗传学教研室	19	47	4.0	6.0
4	李伟	中国医科大学医学遗传学教研室	27	198	8.0	13.0