樱桃病毒A北京分离物外壳蛋白的原核表达及抗血清制备

• 作者: 周涛 周颖 张瑞 张福兴 怀晓 范在丰 郭颂
• 来源期刊: 植物病理学报
• 学科: 农学
• 关键词: 樱桃病毒病 间接ELISA 脱毒苗
• 年，卷（期）: 2010,（6）
• 所属期刊栏目: 病原学
• 页码范围: 568-573
• 分类号: S432.41|S5436.639
• 字数: 3939字
• 语种: 中文

摘要

根据前期研究获得的樱桃病毒A北京分离物(Cherry virus A isolate Beijing,CVA-BJ)外壳蛋白基因序列设计引物,将此基因克隆到原核表达载体pET-28a后转化大肠杆菌BL21(DE3),以终浓度为1 mmol/L的IPTG进行诱导表达.Ni珠吸附法纯化表达产物后免疫家兔制备抗血清.间接ELISA测得抗血清效价为1:2048.以纯化后的蛋白和樱桃叶片总蛋白为检测材料,Western blot分析表明抗血清具有高度特异性.间接ELISA方法检测樱桃病叶,结果呈阳性,与RT-PCR检测结果一致.表明制备的抗血清可用于感病樱桃样品中CVA的检测.