构建重组质粒pEGFP-N1-ND CyclinB1及在胃癌细胞SGC-7901中的表达

• 作者: 朱丽红 李杰芬 杜标炎 毕伟 谭宇蕙 陆大祥
• 来源期刊: 暨南大学学报（自然科学与医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 不可降解CyclinB1 细胞周期蛋白 绿色荧光蛋白 细胞周期 肿瘤
• 年，卷（期）: 2010,（6）
• 页码范围: 555-559
• 分类号: R730.23
• 字数: 3141字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-9965.2010.06.005

摘要

目的:构建真核表达载体pEGFP-N1-ND CyclinB1,并观察其在人胃癌细胞SGC-7901中的表达及对SGC-7901活性的影响.方法:通过RT-PCR法扩增不可降解CyclinB1(ND CyclinB1),将其插入到pEGFP-N1载体的XhoⅠ和BamHⅠ酶切位点,构建真核表达载体pEGFP-N1-ND CyclinB1,并以PCR、双酶切、测序鉴定.通过脂质体法转染胃癌细胞SGC-7901,进行荧光检测、Western blotting分析和流式细胞仪分析.结果:PCR、酶切及测序证明重组质粒pEGFP-N1-ND CyclinB1构建成功.转染胃癌细胞SGC-7901 24 h后,荧光显微镜下观察到绿色荧光.Western blotting检测到CyclinB1的表达明显增加.流式细胞仪检测重组质粒细胞组凋亡指数高于对照组,差异有显著性.结论:成功构建pEGFP-N1-ND CyclinB1荧光真核表达载体,并可在SGC-7901细胞中有效表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	毕伟	中山大学孙逸仙纪念医院神经科	4	27	3.0	4.0
2	朱丽红	暨南大学医学院病理生理学教研室	24	108	6.0	9.0
3	谭宇蕙	广州中医药大学基础医学院	77	679	15.0	23.0
4	陆大祥	暨南大学医学院病理生理学教研室	91	838	17.0	24.0
5	杜标炎	广州中医药大学基础医学院	86	840	17.0	24.0
6	李杰芬	广州中医药大学基础医学院	35	391	13.0	19.0