GA2ox1氧化酶基因的克隆及原核表达

• 作者: 刘选明 常丽 李秀山 林建中 赵小英 郭明
• 来源期刊: 西北植物学报
• 学科: 生物学
• 关键词: GA2ox1基因 Gateway克隆 原核表达 纯化 Western Blot
• 年，卷（期）: 2010,（6）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 1099-1104
• 分类号: Q786
• 字数: 4868字
• 语种: 中文

摘要

采用RT-PCR从拟南芥基因组中克隆到GA2ox1基因,通过Gateway克隆技术构建原核重组表达载体pDEST17-GA2ox1,并转化大肠杆菌BL(21)star,对蛋白原核表达条件进行优化.结果表明,最佳表达条件为温度30℃、IPTG浓度0.2 mmol/L、诱导6 h.蛋白表达形式为包涵体,与Biotech对GA2ox1基因在大肠杆菌中的表达情况推测的结论一致.重组蛋白分子质量约为40 kD,经Ni Sepharose亲和层析柱纯化和Western blot鉴定得纯度90%以上的GA2ox1重组蛋白.研究结果为GA2ox1抗体制备及蛋白功能的进一步研究奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	赵小英	湖南大学生命科学与技术研究院	33	159	8.0	11.0
2	刘选明	湖南大学生命科学与技术研究院	88	747	16.0	23.0
3	郭明	湖南大学生命科学与技术研究院	5	27	3.0	5.0
4	李秀山	湖南大学生命科学与技术研究院	5	14	2.0	3.0
5	林建中	湖南大学生命科学与技术研究院	10	32	4.0	5.0
6	常丽	湖南大学生命科学与技术研究院	2	10	2.0	2.0