大鼠血红素氧化酶1的基因克隆和原核表达

• 作者: 徐波 费邵阳 郑永晨 高航
• 来源期刊: 吉林大学学报（医学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 血红素氧化酶(脱环) 克隆分子 原核表达
• 年，卷（期）: 2007,（6）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 982-985
• 页数: 4页
• 分类号: Q78
• 字数: 2380字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-587X.2007.06.010

摘要

目的:从大鼠脾中克隆出血红素氧化酶1(RHO-1)基因,构建其原核表达载体,并在大肠杆菌中表达其蛋白.方法:用RT-PCR从大鼠脾总RNA中扩增出RHO-1 cDNA,并将其克隆入pMD18-T载体,经TA克隆测序分析后,将阳性TA克隆RHO-1片段亚克隆入pET28a(+)原核表达载体,转化大肠杆菌BL-21,经限制性内切酶图谱鉴定后,阳性菌株经IPTG诱导,SDS-PAGE分析.结果:TA克隆测序分析证实该基因全长870 bp,编码289个氨基酸,所克隆的基因序列与GenBank中登录的RHO-1基因序列完全一致;限制性内切酶图谱结果表明成功构建了RHO-1的原核表达载体;SDS-PAGE结果显示RHO-1基因在大肠杆菌中获得表达.结论:用RT-PCR正确克隆RHO-1基因,构建pET28a(+)/RHO-1表达载体,并成功表达RHO-1融合蛋白.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	高航	吉林大学第二医院中心实验室	53	140	6.0	8.0
2	郑永晨	吉林大学第二医院中心实验室	51	254	9.0	12.0
3	徐波	吉林大学第二医院中心实验室	21	206	8.0	14.0
4	费邵阳	吉林大学第一医院神经外科	3	7	2.0	2.0