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摘要:
[目的]利用农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)介导法对灰葡萄孢(Botrytis cinerea)进行转化,构建T-DNA插入突变体库,为从分子水平上认识灰葡萄孢的致病机制打下基础.[方法]以含有pCAMBIAl390双元载体的农杆菌对灰葡萄孢进行转化,利用潮霉素进行筛选.对抗性稳定的转化子进行生物学和形态学观察,采用离体番茄叶片进行致病性测定.利用TAIL-PCR技术对突变体中T-DNA的旁侧序列进行克隆.[结果]得到了一些突变体,表现为生长速率减缓、产孢能力下降、致病力减弱等.克隆并分析了其中一个突变体中T-DNA插入的位置和旁侧序列.[结论]本实验建立了农杆菌介导的灰葡萄孢转化体系,构建了T-DNA插入的灰葡萄孢突变体库.用TAIL-PCR进行突变体中T-DNA旁侧序列的分析是可行的.
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文献信息
篇名 农杆菌介导的灰葡萄孢T-DNA插入突变体库构建及插入位点分析
来源期刊 微生物学报 学科 生物学
关键词 灰葡萄孢 农杆菌介导 T-DNA TAIL-PCR
年,卷(期) 2010,(2) 所属期刊栏目 遗传和分子生物学
研究方向 页码范围 169-173
页数 5页 分类号 Q933
字数 语种 中文
DOI
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 朱廷恒 浙江工业大学生物与环境工程学院 36 331 9.0 17.0
2 崔志峰 浙江工业大学生物与环境工程学院 41 355 13.0 17.0
3 汪琨 浙江工业大学生物与环境工程学院 40 259 11.0 14.0
4 冯娟 浙江工业大学生物与环境工程学院 1 21 1.0 1.0
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研究主题发展历程
节点文献
灰葡萄孢
农杆菌介导
T-DNA
TAIL-PCR
研究起点
研究来源
研究分支
研究去脉
引文网络交叉学科
相关学者/机构
期刊影响力
微生物学报
月刊
0001-6209
11-1995/Q
大16开
北京朝阳区北辰西路1号中科院微生物所内
2-504
1953
chi
出版文献量(篇)
4459
总下载数(次)
15
相关基金
国家自然科学基金
英文译名:the National Natural Science Foundation of China
官方网址:http://www.nsfc.gov.cn/
项目类型:青年科学基金项目(面上项目)
学科类型:数理科学
论文1v1指导