抑瘤基因NGX6启动子的克隆与功能鉴定

• 作者: 刘敏姬 张德才 彭娅 李桂源 李楠 沈守荣 王晓艳 郭勤
• 来源期刊: 生物化学与生物物理进展
• 学科: 医学
• 关键词: NGX6 转录调控 启动子 Sp1
• 年，卷（期）: 2010,（10）
• 页码范围: 1082-1089
• 页数: 8页
• 分类号: Q257|R735
• 语种: 中文
• DOI: 10.3724/SP.J.1206.2010.00102

摘要

NGX6是一个结直肠癌候选抑瘤基因,其转录调控机制不明.采用生物信息学技术预测其启动子区,并构建NGX6启动子荧光素酶报告基因重组体pGL3/Enhancer/1126.荧光素酶活性检测结果表明该区域具有强启动子活性.应用PromoterInspector program,FistEF,CpGplot和MatInspector Professional软件分析发现,NGX6基因转录调控区为一个不含TATA盒,而含有CAAT盒的GC富集区.凝胶迁移阻滞实验确定NGX6基因启动子区域具有Sp1特异性结合位点,Sp1特异性阻断剂光神霉素(mithramycin A)能明显抑制NGX6启动子的活性和NGX6基因的表达;封闭内源性Sp1能下调NGX6基因mRNA表达水平.