正向和反向SV40 poly(A)信号序列对上游基因表达的影响

• 作者: 侯兵 刘文超 吕赛群 金华君 钱其军
• 来源期刊: 第二军医大学学报
• 学科: 生物学
• 关键词: SV40 poly(A)加尾信号序列 基因表达 双荧光素酶报告系统
• 年，卷（期）: 2010,（6）
• 页码范围: 630-633
• 分类号: Q782|Q786
• 语种: 中文
• DOI: 10.3724/SP.J.1008.2010.00630

摘要

目的 研究正向和反向SV40 poly(A)信号在3种常用细胞株中对上游基因表达的调控作用,为基因表达研究中载体poly(A)信号的选择提供依据.方法 将F-Luc与R-Luc两种荧光素酶基因插入同一质粒,构建带有双荧光素酶报告基因的载体Dual-Luc.在F-Luc基因后分别插入正向和反向互补的SV40 poly(A)信号序列,得到2个带有不同SV40 poly(A)信号的载体Dual-Luc2、Dual-Luc3.将其分别转染常用的3类细胞株293、L-02和HeLa细胞,应用双荧光素酶标仪和反转录聚合酶链反应(RT-PCR)法测定报告基因(F-Luc)的表达量,以R-Luc基因的表达量作对照.结果 成功构建携带正向和反向互补SV40 poly(A)序列的双荧光素酶载体Dual-Luc2、Dual-Luc3;双荧光素酶标仪检测表明,在293细胞中,Dual-Luc2、Dual-Luc3的F-Luc/R-Luc比值分别为3.25±0.43、3.03±0.14,差异无统计学意义(P＞0.05);在L-02细胞中,Dual-Luc2、Dual-Luc3的F-Luc/R-Luc比值分别为6.16±0.39、3.83±0.39,差异有统计学意义(P＜0.05);在HeLa细胞中,Dual-Luc2、Dual-Luc3的F-Luc/R-Luc比值分别为1.21±0.10、0.66±0.02,差异有统计学意义(P＜0.05).RT-PCR检测与荧光素酶检测结果一致.结论 不同细胞中poly(A)信号序列对上游基因的调控作用存在差异;poly(A)信号对上游基因的调控作用主要发生于转录水平.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	钱其军	第二军医大学东方肝胆外科医院病毒基因治疗实验室	106	367	10.0	15.0
2	刘文超	第四军医大学西京医院肿瘤科	137	968	16.0	24.0
3	侯兵	第四军医大学西京医院肿瘤科	7	12	2.0	3.0
5	金华君	第二军医大学东方肝胆外科医院病毒基因治疗实验室	7	27	2.0	5.0
8	吕赛群	第二军医大学东方肝胆外科医院病毒基因治疗实验室	1	1	1.0	1.0