华支睾吸虫乳酸脱氢酶E10-20及E94-102表位的克隆表达与生物学特性初步研究

• 作者: 余新炳 徐劲 王乐旬 胡旭初 邓传欢 黄灿 黄艳
• 来源期刊: 中山大学学报（医学科学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 华支睾吸虫 乳酸脱氢酶 表位
• 年，卷（期）: 2010,（4）
• 页码范围: 486-490
• 分类号: R382 2+2
• 字数: 3292字
• 语种: 中文

摘要

[目的]原核克隆及表达华支睾吸虫乳酸脱氢酶(CsLDH)两个表位aa10-20(E10-20)及aa94-102(E94-102),初步研究两表位与CsLDH免疫学及酶学相互关系.[方法]将E10-20及E94-102克隆至pGEX-4T-1载体,表达纯化重组蛋白,用Western Blotting和间接ELISA法检测CsLDH免疫血清对表位霞组蛋白的识别,同时检测两表位重组蛋白的免疫血清对CsLDH蛋白的识别;利用CsLDH标准酶活性反应体系.比较两表位免疫血清与CsLDH免疫血清对CsLDH催化丙酮酸还原成乳酸反应的影响.[结果]成功构建pGEX-4T-1-E1010-20及pGEX-4T-1-E94-10重组质粒,SDS.PAGE鉴定表达的重组蛋白,菌体裂解液经亲和层析纯化,获得与GST融合表达的蛋白E10-20及E94-102.两表位重组蛋白均可被CsLDH免疫血清识别,而对E94-10更易于识别;重组CsLDH也能被E10-20及E94-102免疫血清识别,而不能被对照血清识别.E94-10免疫血清能抑制CsLDH催化丙酮酸还原成乳酸的反应.[结论]表位结构和功能研究深化了对CsLDH结构的理解,并为开辟CsLDH疫苗研究新路径奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	余新炳	中山大学中山医学院寄生虫教研室	201	1352	17.0	28.0
2	徐劲	中山大学中山医学院寄生虫教研室	104	568	13.0	17.0
3	胡旭初	中山大学中山医学院寄生虫教研室	108	574	13.0	17.0
4	黄艳	中山大学中山医学院寄生虫教研室	69	318	9.0	13.0
5	黄灿	中山大学中山医学院寄生虫教研室	22	139	6.0	11.0
6	王乐旬	中山大学中山医学院寄生虫教研室	8	26	3.0	5.0
7	邓传欢	中山大学中山医学院寄生虫教研室	3	6	1.0	2.0