基因芯片检测5种动物冠状病毒的初步研究

• 作者: 张建武 李健 熊炜 王巧全 王权 胡永强 谢爱织 陈沁
• 来源期刊: 畜牧与兽医
• 学科: 农学
• 关键词: 冠状病毒 基因芯片 杂交 检测
• 年，卷（期）: 2010,（12）
• 页码范围: 16-21
• 分类号: S855.3
• 字数: 4273字
• 语种: 中文

摘要

采用蔗糖密度梯度离心,纯化浓缩犬冠状病毒(CCV)、猫冠状病毒(FCV)、猫传染性腹膜炎病毒(FIPV)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)、猪呼吸道冠状病毒(PRCV)的细胞培养物,分别设计7,17,11,10和4对引物,构建了49个基因片段的克隆.煮沸裂解法制备质粒DNA,回收PCR扩增产物,点制冠状病毒基因芯片.抽提病毒总RNA,利用Cy3-dCTP随机渗人反转录PCR标记,与芯片进行杂交检测,淘汰交叉的克隆片段.结果表明:克隆CCV1,CCV2,CCV5和CCV7可特异诊断CCV,克隆FCV6,FCV7,FCV8和FCV9可特异诊断FCV,克隆FIPV2,FIPV7,FIPV8和FIPV9可特异诊断FIPV,克隆PRCV1,PRCV2和PRCV3可特异诊断PRCV,克隆TGEV3,TGEV4,TGEV5和TGEV6可特异诊断TGEV.将这些特异克降扩增片段重新点制基因芯片,与病毒PCR产物杂交,未发现交叉现象.基因芯片检测比传统PCR敏感1 000倍,可有效应用于这5种动物冠状病毒的检测与区分.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王权	中国农业科学院上海兽医研究所	65	346	11.0	15.0
2	李健		50	270	9.0	12.0
3	王巧全		33	179	8.0	11.0
4	胡永强		40	362	12.0	17.0
5	陈沁	上海大学生命科学学院	66	529	13.0	20.0
6	熊炜		37	146	7.0	9.0
7	张建武	中国农业科学院上海兽医研究所	10	63	6.0	7.0
8	谢爱织		3	10	2.0	3.0