7种动物冠状病毒基因芯片同步检测的研究

• 作者: 张建武 李健 李树清 熊炜 王巧全 王权 胡永强 陈沁
• 来源期刊: 中国兽医科学
• 学科: 农学
• 关键词: 冠状病毒 基因芯片 杂交 检测
• 年，卷（期）: 2007,（7）
• 所属期刊栏目: 病原生物学
• 页码范围: 557-562
• 页数: 6页
• 分类号: S852.659.6
• 字数: 5178字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-4696.2007.07.003

摘要

根据发布的7种动物冠状病毒相关基因的序列,给每种病毒设计了4～17对引物,同时依据RNA聚合酶基因序列合成了l对兼并引物,利用TCV原毒和纯化浓缩的CCV、FCV、FIPV、TGEV、PRCV、BCV细胞毒,构建了89个基因片段的克隆.采用煮沸裂解法制备质粒DNA,进行特异引物PCR扩增,回收纯化产物,点制冠状病毒基因芯片.抽提病毒总RNA,利用Cy3-dCTP随机渗入反转录PCR标记,同时对BCV、CCV利用Cy3-dCTP随机渗入反转录标记,与芯片进行杂交检测.结果显示,BCV和TCV基因克隆间未见交叉,CCV、FCV、FIPV、TGEV、PRCV则存在广泛交叉.选择无交叉的特异克隆片段点制最终基因芯片,并与病毒多重PCR扩增产物杂交,芯片信号未见交叉,结果判断明确.表明,基因芯片检测法比传统PCR法敏感1000倍.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王权	中国农业科学院上海兽医研究所	65	346	11.0	15.0
2	李健		50	270	9.0	12.0
3	李树清		46	278	10.0	13.0
4	王巧全		33	179	8.0	11.0
5	胡永强		40	362	12.0	17.0
6	陈沁	上海大学生命科学学院	66	529	13.0	20.0
7	熊炜		37	146	7.0	9.0
8	张建武	中国农业科学院上海兽医研究所	10	63	6.0	7.0