扩增内标在副溶血弧菌多重PCR检测方法中的应用

• 作者: 刘月萍 吕淑霞 张喆 祝儒刚 胡英
• 来源期刊: 沈阳农业大学学报
• 学科: 工学
• 关键词: 扩增内标对照 多重PCR 副溶血弧菌 特异性 灵敏度
• 年，卷（期）: 2010,（6）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 701-705
• 分类号: TS201.3
• 字数: 3561字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-1700.2010.06.013

摘要

建立扩增内标存在下同时检测副溶血弧菌tlh基因和trh基因的多重PCR方法.以细菌16SrDNA片段为扩增内标对照(internal amplification control,IAC),副溶血弧菌不耐热溶血毒素(thermolabile hemolysin,TLH)基因tlh和相对耐热直接溶血毒素(thermostable related hemolysin,TRH)基因trh为检测基因,设计引物,并优化多重PCR体系.特异性及灵敏度试验结果表明:该多重PCR体系检测致病性副溶血弧菌表现出极好的特异性.纯培养条件下,扩增内标存在时tlh基因和致病基因trh的检测灵敏度分别为1.3×102 cfu·mL-1和1.3×103cfu·mL-1;人工污染牡蛎样品,不经富集培养,扩增内标存在时tlh基因和致病基因trh的检测灵敏度分别为2.6×103 cfu·mL-1和2.6×104 cfu·mL-1:经过6h的富集培养,tlh基因和trh基因的检测限均能达到2.6×102 cfu·mL-1.该检测体系特异性强、灵敏度高,并且扩增内标的存在可排除PCR检测致病性副溶血弧菌可能导致的假阴性结果,可提高检测的速度和精准度.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	吕淑霞	沈阳农业大学食品学院	97	810	15.0	23.0
5	祝儒刚	沈阳农业大学食品学院	15	55	4.0	7.0
9	刘月萍	沈阳农业大学生物科学技术学院	3	23	2.0	3.0
10	张喆	沈阳农业大学生物科学技术学院	5	22	2.0	4.0
11	胡英		19	116	7.0	10.0