幽门螺杆菌黏附素A有效T和B联合抗原表位噬菌体展示和抗原性测定

• 作者: 丁威 严杰 严瑾 俞利平 冯雪鸣 罗冬娇 陈小囡
• 来源期刊: 中华微生物学和免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 幽门螺杆菌 黏附素A基因 噬菌体展示 B细胞表位 T细胞表位
• 年，卷（期）: 2010,（6）
• 所属期刊栏目: 免疫检测
• 页码范围: 570-575
• 分类号: R4
• 字数: 5251字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0254-5101.2010.06.019

摘要

目的 分析并确定幽门螺杆菌黏附素A(HpaA)分子中有效T细胞和B细胞联合(T/B)抗原表位.方法 重组表达HpaA(rHpaA)并免疫家兔制备抗血清.采用生物信息学技术预测和分析HpaA分子中T细胞和B细胞表位,PCB扩增T/B联合表位肽片段并构建其噬菌体展示系统.采用PEG/NaCl沉淀法提纯展示了T/B联合表位的重组噬菌体PⅢ蛋白(rPⅢ).分别以商品化幽门螺杆菌全菌IgG抗体和rHpaA抗血清为一抗,采用Western blot和ELISA对rPⅢ蛋白中展示的T/B联合表位进行筛选和鉴定.采用MTT检测rHpaA免疫小鼠脾细胞在不同重组噬菌体蛋白刺激下的增殖情况.结果 HpaA分子中共有5个T/B联合表位:HpaA10、HpaA37、HpaA79、HpaA116和HpaA143.所有T/B联合表位均成功地展示于M13噬菌体PⅢ蛋白表面.Western blot、ELISA和淋巴细胞增殖试验结果 均显示,HpaA116是优势抗原表位,HpaA37和HpaA79为有效抗原表位,HpaA10和HpaA143为无效抗原表位.结论 本研究成功地构建了幽门螺杆菌HpaA的T/B联合表位肽噬菌体展示系统.HpaA37和HpaA79,尤其是HpaA116是HpaA有效T/B联合抗原表位.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	严瑾	杭州师范大学钱江学院	13	121	4.0	11.0
2	罗冬娇	杭州师范大学钱江学院	52	209	9.0	11.0
3	陈小囡	杭州师范大学基础医学部	22	224	10.0	14.0
4	俞利平	杭州师范大学基础医学部	17	168	8.0	12.0
5	丁威		6	27	3.0	5.0
6	冯雪鸣	杭州师范大学基础医学部	5	6	2.0	2.0