鲫鱼淋巴细胞转化PHA刺激剂量及流式细胞仪检测参数探讨

• 作者: 叶元土 夏燕美 施陈江 王文娟 蔡春芳
• 来源期刊: 上海海洋大学学报
• 学科: 农学
• 关键词: 异育银鲫 淋巴细胞转化 流式细胞仪 DNA增殖指数
• 年，卷（期）: 2010,（2）
• 所属期刊栏目: 生产生物技术
• 页码范围: 167-171
• 分类号: S917
• 字数: 3651字
• 语种: 中文

摘要

从异育银鲫外周血中分离淋巴细胞,利用RPMI-1640培养基培养48 h后,采用流式细胞仪分析方法研究不同浓度的植物凝集素(phytohemagglutinin, PHA) (0 μg/mL、80 μg/mL、200 μg/mL、400 μg/mL、600 μg/mL、800 μg/mL、1 000 μg/mL、1 200 μg/mL)对外周血淋巴细胞转化率的影响,旨在探索异育银鲫外周血淋巴细胞体外转化最适刺激剂量.结果表明:(1)在PHA浓度0～400 μg/mL的范围内,随着PHA浓度的增加,淋巴细胞转化率也增加,呈浓度依赖的关系,但当PHA的浓度增加到1 200 μg/mL,淋巴细胞转化率明显下降.其中PHA浓度为400 μg/mL时,淋巴细胞转化率最高,显著高于低浓度组(80 μg/mL)和高浓度组(1 000 μg/mL、1 200 μg/mL)(P<0.05),略高于中浓度组(200 μg/mL、600 μg/mL、800 μg/mL),差异不显著(P>0.05).由此可见,在本试验条件下,PHA体外刺激异育银鲫淋巴细胞转化的最适剂量为400 μg/mL.(2)用流式细胞仪检测细胞内DNA合成情况,Multicycle AV软件进行细胞周期分析,通过DNA增殖指数测定淋巴细胞转化率是一种简单、可靠的方法.需要注意的是,采用流式细胞仪测定鲫鱼淋巴细胞转化率时,FS/SS参数设置为FS: Volts 62-gain 100;SS: Volts 1000-gain 500能够获得清晰的图像.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	叶元土	苏州大学基础医学与生物科学学院	212	1802	22.0	29.0
2	蔡春芳	苏州大学基础医学与生物科学学院	164	1874	23.0	36.0
3	王文娟	苏州大学基础医学与生物科学学院	26	134	8.0	10.0
4	施陈江	苏州大学基础医学与生物科学学院	5	60	4.0	5.0
5	夏燕美	苏州大学基础医学与生物科学学院	3	21	2.0	3.0