流感泰得小分子化合物修饰前后细胞摄取的比较

• 作者: 吴小桃 张玉林 李树 杨兰兰 王升启 赵海豹 鲁丹丹
• 来源期刊: 军事医学科学院院刊
• 学科: 医学
• 关键词: 反义寡核苷酸 流感泰得 奥司他韦 偶联 细胞摄取 转染 流式细胞术 正黏病毒科 抗流感病毒活性
• 年，卷（期）: 2010,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 105-110
• 分类号: R373.1
• 字数: 5844字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-9960.2010.02.002

摘要

目的 在反义寡核苷酸流感泰得(Flutide, FT)上偶联神经氨酸酶抑制剂奥司他韦,以期通过特定小分子化合物的修饰提高细胞对流感泰得的摄取,进而提高其抗流感的作用.方法 采用3′荧光标记控孔玻璃珠(3′FAM CPG)合成全硫代修饰的流感泰得,并对其5′端进行巯基修饰,与结构改造后的奥司他韦分子进行连接得到流感泰得与奥司他韦偶联物(FTO);修饰前后的反义药物直接转染流感病毒感染的人肺癌上皮A549细胞,通过荧光显微镜观察及流式细胞技术检测FTO与FT的胞内荧光强度来进行反义药物偶联小分子化合物前后胞内摄取量的比较;采用CCK8细胞增殖检测技术进行FT与FTO体外抗流感病毒活性评价.结果 得到一种新的寡核苷酸偶联物FTO;荧光显微镜观察结果显示,细胞给予FTO后荧光强度强于FT;流式细胞检测结果表明,修饰后的FTO胞内平均荧光值明显高于修饰前的FT,其中给药12 h时,病毒感染细胞+FTO(BFTO)组的平均荧光值比病毒感染细胞+FT(BFT)组增加了(102.3±56.0)%,正常细胞+FTO(ZFTO)组的平均荧光值比正常细胞+FT(ZFT)组增加了(89.4±44.7)%;给药24 h后BFTO组的平均荧光值比BFT组增加了(115.2±28.4)%,ZFTO组的平均荧光值比ZFT组增加了(102.9±12.1)%,(P＜0.05);体外抗流感病毒活性评价显示,FTO与FT的IC50值分别为(1.57±0.08)μmol/L与(4.44±0.11)μmol/L.结论 流感泰得采用奥司他韦修饰后有助于提高其在细胞内的摄取量以及抗流感病毒活性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王升启	军事医学科学院放射与辐射医学研究所	315	3297	28.0	41.0
2	吴小桃	军事医学科学院放射与辐射医学研究所	4	11	3.0	3.0
3	鲁丹丹	军事医学科学院放射与辐射医学研究所	15	51	5.0	6.0
4	张玉林	军事医学科学院放射与辐射医学研究所	2	8	2.0	2.0
5	李树	军事医学科学院放射与辐射医学研究所	3	20	3.0	3.0
6	赵海豹	军事医学科学院放射与辐射医学研究所	3	33	3.0	3.0
7	杨兰兰		1	3	1.0	1.0