人黑素瘤单链抗体-量子点纳米探针的制备及其与黑素瘤细胞特异性结合

• 作者: 任秋实 刘彬 宋华 崔大祥 张堂德 张小敏 李娜 李智铭 贺蓉 鲍晨晨
• 来源期刊: 中国肿瘤生物治疗杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 素瘤 神经节苷脂 单链抗体 量子点 纳米探针
• 年，卷（期）: 2010,（1）
• 所属期刊栏目: 专题报道:黑素瘤生生治疗的基础研究
• 页码范围: 30-35
• 页数: 6页
• 分类号: R739.5|R730.3
• 字数: 3685字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3872/j.issn.1007-385X.2010.01.006

摘要

目的:制备抗人黑素瘤细胞单链抗体与碲化镉量子点(CdTe guantun dot,CdTe)连接的纳米探针,观察其对恶性黑素瘤细胞的特异性结合效果.方法:将抗人黑素瘤神经节苷脂单链抗体(anti-human melanoma ganglioside single chain variable fragment antibody,GD/ScFvMEL)基因克隆到pET32a(+)载体中,然后在BL21(DE3)细菌中进行诱导表达,采用变性法纯化表达的蛋白,再用改良的透析法复性目的蛋白,SDS-PAGE分析表达的GD/ScFvMEL抗体蛋白.制备的GD/ScFvMEL抗体与量子点连接制备成纳米探针GD/ScFvMEL-QDs,然后与黑素瘤A375细胞株及胃癌MGC-803细胞株孵育,观察纳米探针与肿瘤细胞结合的特异性.结果:PCR、双酶切和序列测定证实重组子的拼接完全正确,SDS-PADE结果显示,GD/ScFvMEL抗体的表达量达40%.纯化复性后的GD/ScFvMEL抗体连接量子点制备GD/ScFvMEL-QDs纳米探针,经扫描电镜、X衍射分析、荧光光谱和SDS-PAGE分析证实纳米探针的成功制备.GD/ScFvMEL-QDs纳米探针能特异性结合A375黑素瘤细胞,不与胃癌细胞MGC-803细胞结合.结论: 成功制备抗人黑素瘤神经节苷脂单链抗体-量子点纳米探针,该探针可特异性结合黑素瘤细胞.