AngⅡ通过AP-1调控内皮细胞中巨噬细胞移动抑制因子(MIF)的表达

• 作者: 余细勇 冯治宽 单志新 朱杰宁 林秋雄 谭虹虹 邓春玉 邝素娟 麦丽萍
• 来源期刊: 热带医学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 双萤光素酶报告基因系统 巨噬细胞移动抑制因子 AngⅡ 克隆,分子
• 年，卷（期）: 2010,（2）
• 所属期刊栏目: 硕博专栏论著
• 页码范围: 115-119
• 页数: 5页
• 分类号: Q78
• 语种: 中文

摘要

目的 明确介导AngⅡ调控人内皮细胞中巨噬细胞移动抑制因子(migration inhibitory factor,MIF)表达的转录因子.方法 构建长度依次递减的MIF基因5'调控区的荧光报告基因表达载体,并将其转化入人脐静脉内皮细胞EAhy926.利用双荧光基因报告系统检测AngⅡ诱导后MIF基因5'调控区不同区段的转录活性.通过突变转录活性高的MIF 5'调控区序列.初步确定可能的转录因子结合序列.设计针对可能的转录因子的小干扰RNA(siRNA)序列,并构建其表达载体,分别检测候选转录因子沉默的HEAY926中MIF的转录活性和表达水平.结果 双荧光基因报告检测显示,Ang Ⅱ调控MIF表达的高转录活性区段位于-507至-188之间.序列突变和荧光素酶活性分析显示,MIF基因5'调控区-350至-339问的AP-1结合序列决定了MIF基因的转录活性.AP-1沉默后的HEAY926中AngⅡ调控的MIF转录活性显著降低(P<0.05),MIF mRNA和蛋白的表达水平也显著降低(P<0.05).结论 AngⅡ通过转录因子AP-1调控内皮细胞中MIF的表达.