玉米In5-2启动子功能区域在洋葱瞬时表达系统中的分析

• 作者: 周忻 唐小革 梅晓宏 罗云波 许文涛 马亮 黄昆仑
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 学科: 农学
• 关键词: 洋葱表皮细胞 根癌农杆菌 GUS基因 瞬时表达 玉米In5-2启动子
• 年，卷（期）: 2010,（6）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 1073-1078
• 分类号: S5
• 字数: 5145字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2010.06.006

摘要

本研究旨在通过对根癌农杆菌侵染洋葱表皮细胞的条件进行优化,从而建立一种新的瞬时表达系统,并将其应用于玉米In5-2启动子的功能区域的分析中,明确In5-2启动子的乙酰苯胺类化合物诱导元件的具体位置.在本研究中采用根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)侵染洋葱(Allium cepa)表皮细胞,对转β-葡糖醛酸酶(GUS)基因的瞬时表达进行研究,并分析了侵染液中乙酰丁香酮(As)的浓度、侵染时间、菌液浓度、共培养时间对GUS基因的瞬间表达的影响.结果显示,在OD600值为0.8的农杆菌液中感染15 min,共培养3 d,能够得到较高的GUS基因瞬间表达,从而建立了一种新的瞬间表达系统.同时,构建了含不同长度的玉米(Zea mays)In5-2启动子片段缺失载体,利用新的瞬时表达系统分析其功能区域,推测出乙酰苯胺类化合物诱导元件位于ATG上游-220～-143 bp之间.结果表明新的瞬时表达系统可以快速有效地进行启动子的分析.