新加坡石斑鱼虹彩病毒ORF086蛋白的原核表达、纯化及抗体制备

• 作者: 刘森林 夏立群 张红莲 梁海鹰
• 来源期刊: 上海海洋大学学报
• 学科: 农学
• 关键词: 新加坡石斑鱼虹彩病毒 原核表达 多克隆抗体 SGIV ORF086重组蛋白
• 年，卷（期）: 2010,（1）
• 所属期刊栏目: 水产生物技术
• 页码范围: 1-6
• 分类号: Q786|S917
• 字数: 4372字
• 语种: 中文

摘要

新加坡石斑鱼虹彩病毒(Singapore grouper iridovirus,SGIV)是导致石斑鱼养殖严重经济损失的主要病原体.本研究构建了含有新加坡石斑鱼虹彩病毒(Singapore grouper iridovirus,SGIV)ORF086基因的重组表达质粒载体pET32a-ORF086,将其转化到大肠杆菌中进行融合表达, 经SDS-PAGE分析和Western blot鉴定,证实重组大肠杆菌融合表达了SGIV ORF086蛋白.经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(isoprophl-thio-β-D-galactopyranoside, IPTG)浓度、诱导温度、诱导时间等诱导表达条件的优化,确定在0.7 mmol/L IPTG、16 ℃诱导14 h时可溶性SGIV ORF086重组蛋白占重组蛋白的60%.经镍琼脂糖凝胶柱纯化重组蛋白,纯化度达95%以上.用纯化的SGIV ORF086蛋白免疫小鼠,获得了高效特异的SGIV ORF086抗血清.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	梁海鹰	广东海洋大学水产学院	25	82	5.0	8.0
3	张红莲	广东海洋大学水产学院	13	24	3.0	4.0
5	夏立群	广东海洋大学水产学院	23	58	4.0	6.0
13	刘森林	广东海洋大学水产学院	1	4	1.0	1.0