油菜黄化突变体蛋白质组分析:两种蛋白质提取方法比较

• 作者: 刘海衡 张蕊 胡胜武 赵惠贤
• 来源期刊: 生物化学与生物物理进展
• 学科: 生物学
• 关键词: 芥菜型油菜 黄化突变体 叶片蛋白 蛋白质提取 双向电泳
• 年，卷（期）: 2010,（9）
• 页码范围: 1025-1032
• 页数: 8页
• 分类号: Q51|Q946.1
• 语种: 中文
• DOI: 10.3724/SP.J.1206.2010.00176

摘要

以芥菜型油菜黄化突变体L638-y及其野生型L638-g五叶期叶片为材料,用IEF/SDS-PAGE双向凝胶电泳技术对两种不同蛋白质提取方法(TCA/丙酮沉淀法和改进的PEG分级沉淀法)进行了比较,同时在IPG胶条pH范围及SDS-PAGE胶浓度选择上进行了探索与优化.结果表明,以pH 4～7 17 cm的线性IPG胶条进行IEF,11%SDS-PAGE进行第二向电泳,每350 μl体系上样量为180 μg,蛋白质可以得到较好的分离,2-DE图谱质量最佳.用改进的PEG分级沉淀法提取的突变体L638-y叶片总蛋白的2-DE图谱可清晰识别的蛋白质点数目为(1235±6)个,比TCA/丙酮沉淀法多识别出330个蛋白质点;用该方法提取蛋白质时,在突变体L638-y与其野生型L638-g叶片总蛋白2-DE图谱上可识别出差异蛋白质点数目为190个,比用TCA/丙酮沉淀法提取蛋白质时多鉴别出100个差异蛋白质点.由此表明,研究芥菜型油菜黄化突变体L638-y叶片蛋白质组变化,采用改进的PEG分级沉淀法提取蛋白质更为简单有效.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	赵惠贤		34	374	11.0	18.0
2	胡胜武		54	597	16.0	22.0
3	张蕊		18	185	8.0	13.0
4	刘海衡		4	64	3.0	4.0