利用噬菌体随机肽库筛选传染性法氏囊病病毒VP2模拟表位

• 作者: 孙寅剑 崔金生 朱彩霞 朱瑞良 杨春晓 王小娥 肖海君
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 学科: 农学
• 关键词: 模拟表位 噬菌体随机12肽库 噬菌体展示技术
• 年，卷（期）: 2010,（3）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 573-579
• 分类号: S8
• 字数: 5225字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2010.03.025

摘要

用纯化的4株传染性法氏囊病病毒(IBDV)VP2单克隆抗体(1B5,5D1,2H11和I4-4-3)筛选噬菌体随机12肽库,对40个克隆(10个单克隆噬菌斑×4株单克隆抗体)进行ELISA验证,获得32个阳性克隆,选20个阳性克隆(5个单克隆噬菌斑×4株单克隆抗体)进行DNA序列分析,确定了4个优势12肽为不同传染性法氏囊病病毒(IBDV)抗原表位.这4个12肽在一级结构上没有3个以上连续氨基酸与GenBank中传染性法氏囊病病毒、VP2的氨基酸序列相同之处,与单抗的结合可被VP2蛋白有效地抑制,推测可能是构象依赖性表位.将4个模拟表位串联表达后获得目的蛋白,经SDS-PAGE分析,目的蛋白占菌体总蛋白的20%,分子量30 kD.用多克隆抗体对目的蛋白进行免疫印迹分析,结果表明目的蛋白具有特异性和反应原性.试验结果提示:筛选的是传染性法氏囊病病毒(IBDV)VP2单抗的模拟表位.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	朱瑞良	山东农业大学动物科技学院	161	909	16.0	22.0
2	崔金生	山东农业大学动物科技学院	10	58	4.0	7.0
3	杨春晓	山东农业大学动物科技学院	6	31	3.0	5.0
5	肖海君	山东农业大学动物科技学院	8	32	3.0	5.0
8	朱彩霞	山东农业大学动物科技学院	2	14	2.0	2.0
9	孙寅剑	山东农业大学动物科技学院	2	41	2.0	2.0