MyD88干涉慢病毒颗粒的包装和鉴定

• 作者: 刘芬菊 周仕香 张学清 王治东 董波 陈肖华 韩春光 高荣莲
• 来源期刊: 军事医学科学院院刊
• 学科: 医学
• 关键词: 髓样分化相关蛋白 慢病毒 RNA干涉 细胞系 质粒
• 年，卷（期）: 2010,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 150-152
• 分类号: R373
• 字数: 2390字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-9960.2010.02.013

摘要

目的 制备MyD88分子的慢病毒干涉颗粒,建立稳定下调MyD88的HEK293细胞系.方法 将携带特异性干涉序列的DNA片段克隆入干涉质粒pSicoR中,并制备携带不同干涉序列的慢病毒颗粒.将慢病毒颗粒感染HEK293细胞,建立稳定细胞系,经RT-PCR和报告基因分析方法确定不同干涉序列对MyD88表达的下调及信号通路激活的阻断作用.结果 成功制备携带干涉序列的慢病毒颗粒,并获得稳定感染慢病毒的HEK293细胞系,经鉴定发现感染912位序列的细胞MyD88 mRNA表达水平下调为对照组的28%,对CBLB502的激活作用下降为对照组的24%.结论 成功制备MyD88的慢病毒干涉颗粒,可用于建立MyD88稳定下调的细胞系.