逆转录病毒转染胚盘细胞制备嵌合体鸡胚的研究

• 作者: 安铁洙 张秋婷 苗向阳
• 来源期刊: 中国农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 逆转录病毒 增强型绿色荧光蛋白 胚盘细胞 嵌合体 鸡
• 年，卷（期）: 2010,（15）
• 页码范围: 3266-3270
• 分类号: S8
• 语种: 中文
• DOI: 10.3864/j.issn.0578-1752.2010.15.027

摘要

[目的]通过重组逆转录病毒体内感染源于第X期胚盘细胞的方法获得嵌合体鸡.[方法]将扩增的增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因的开放阅读框插入逆转录病毒表达载体pour-pBabe中获得重组逆转录表达载体;采用磷酸钙转染法将其与包装载体pVSVG共转入293 10A1包装细胞中进行病毒包装,得到病毒原液经超速离心浓缩200倍后注入种蛋(第X期)胚盘下腔,孵化种蛋.提取孵化5.5天的鸡胚基因组DNA,进行PCR检测和Southern杂交检测.[结果]构建含EGFP完整开放阅读框的逆转录病毒表达载体pour-pBabe-EGFP,提取孵化5.5 d鸡胚基因组DNA,经PCR、Southern杂交检测,嵌合体阳性率分别为75%和66.7%.[结论]通过用重组逆转录病毒体内感染鸡胚盘细胞的方法可获得嵌合体鸡.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	苗向阳	中国农业科学院北京畜牧兽医研究所	71	407	11.0	16.0
2	安铁洙	东北林业大学生命科学学院	75	199	8.0	10.0
3	张秋婷	中国农业科学院北京畜牧兽医研究所	13	37	3.0	5.0