逆转录病毒介导的凋亡素基因诱导人结肠癌细胞Lovo的凋亡

• 作者: 朱惠明 杨俊文 王娜 黄勋
• 来源期刊: 肿瘤防治研究
• 学科: 医学
• 关键词: 凋亡素 细胞凋亡 人结肠癌细胞Lovo
• 年，卷（期）: 2010,（2）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 146-149
• 页数: 4页
• 分类号: R735.3~+5
• 语种: 中文
• DOI: 10.3971/j.issn.1000-8578.2010.02.006

摘要

目的 构建强力霉素诱导型重组凋亡素基因逆转录病毒载体,观察强力霉素诱导凋亡素基因表达的情况及对人结肠癌细胞的影响. 方法 构建重组逆转录病毒表达载体pRevTRE-VP3.调节载体pRevTet-on和表达载体pRevTRE-VP3分别转染PT67包装细胞后,收集包装好的病毒依次感染人结肠癌细胞系Lovo,用抗生素筛选出抗性细胞株Lovo/on-vp3.通过向培养液中加入或去除强力霉素调控凋亡素基因在Lovo/on-vp3细胞中的表达,Annexin V-FITC/PI双染色后,以流式细胞仪检测细胞凋亡率. 结果 经酶切和测序鉴定,重组逆转录病毒载体pRevTRE-VP3构建成功,并添加了kozak序列.筛选出可经四环素调控凋亡素基因表达的人结肠癌细胞株Lovo/on-vp3,经PCR和RT-PCR证实凋亡素基因已整合入细胞DNA,并得到了表达;Lovo/on-vp3细胞在1 mg/L强力霉素培养环境中培养24h、48 h和72 h凋亡率明显高于无强力霉素环境中相同时间点的细胞凋亡率,两者差异有显著性. 结论 凋亡素基因经RevTet系统导入人结肠癌细胞Lovo后,在强力霉素诱导下可表达凋亡素蛋白并诱导Lovo细胞凋亡.并随诱导时间延长凋亡素蛋白表达增加、细胞凋亡增多.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王娜	暨南大学医学院第二附属医院深圳市人民医院消化内科	19	76	5.0	8.0
2	黄勋	暨南大学医学院第二附属医院深圳市人民医院消化内科	16	101	6.0	9.0
3	朱惠明	暨南大学医学院第二附属医院深圳市人民医院消化内科	60	235	8.0	11.0
4	杨俊文	暨南大学医学院第二附属医院深圳市人民医院消化内科	3	11	3.0	3.0