用于丝状真菌的苯菌灵标记基因benA表达载体的构建

• 作者: 农向群 张泽华 张雄鹏
• 来源期刊: 生物技术通报
• 学科: 生物学
• 关键词: PgpdA启动子 TtrpC终止子 苯菌灵抗性基因benA 表达载体构建 丝状真菌
• 年，卷（期）: 2010,（6）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 243-250
• 分类号: Q94
• 字数: 5429字
• 语种: 中文

摘要

为了构建适用于丝状真菌遗传转化的表达载体,在质粒pAN52-1的高效组成型三磷酸甘油醛脱氢酶基因启动子PgpdA和色氨酸C基因终止子TtrpC之间加入内切酶NotⅠ和ClaⅠ两个位点,构成质粒pAN52-2;把质粒pAN52-2中从启动子PgpdA到终止子TtrpC的基因片段通过PstⅠ和XbaⅠ酶切位点导入到pUC19载体上,并且应用PCR的方法在启动子PgpdA的前端引入HindⅢ酶切位点,构成质粒pUCPT-2;通过PCR,在苯菌灵抗性基因benA两端分别加入内切酶NotⅠ和ClaⅠ酶切位点,并克隆到pGEM-T载体上,得到质粒pGEM-Ben;用NotⅠ分别酶切质粒pUCPT-2与pGEM-Ben,连接苯菌灵抗性基因benA到pUCPT-2上,得到了pUCPT-Ben载体.经PCR、酶切和核苷酸序列检测,证实了PgpdA-benA-TtrpC表达元件连接成功,即得到了苯菌灵抗性基因高效表达载体.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张泽华	中国农业科学院植物保护研究所	57	538	13.0	20.0
2	农向群	中国农业科学院植物保护研究所	28	217	9.0	13.0
3	张雄鹏	沈阳农业大学植物保护学院	1	2	1.0	1.0