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shRNA沉默IRS-1基因对鼠前脂肪细胞分化和PPARγ表达的影响
shRNA沉默IRS-1基因对鼠前脂肪细胞分化和PPARγ表达的影响
作者:
周后德
唐爱国
唐玲丽
基本信息来源于合作网站,原文需代理用户跳转至来源网站获取
胰岛素受体底物-1
脂质过氧化物酶体增殖物激活受体γ
RNA干扰
3T3-L1前脂肪细胞
摘要:
目的 观察胰岛素受体底物-1(IRS-1)基因表达受阻对小鼠3T3-L1前脂肪细胞分化和脂质过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)表达的影响.方法 针对小鼠IRS-1基因开放阅读框上的2个区域合成短发夹核糖核酸[shRNA(M和MH)],以pGenesil-1 vector为载体构建带绿色荧光蛋白(GFP)靶标的shRNA质粒.以脂质体LipofectaminTM2000介导转染3T3-L1前脂肪细胞,并设阴性对照(HK)载体转染组.细胞转染后,G418筛选稳定表达的阳性克隆并通过免疫印迹法鉴定.应用0.5 mmol/L 3-异丁基-1-甲基黄嘌呤(IBMX)、10-6 mol/L地塞米松(DEX)和5 μg/mL胰岛素(Ins)分别诱导小鼠3T3-L1前脂肪细胞空白对照组、HK载体转染组、M和MH转染组分化,在诱导分化的不同时间点收集细胞.用免疫印迹法检测PPARγ的表达.脂肪细胞内脂滴用油红O染色观察.结果 与空白对照组、HK组和转染M组IRS-1 shRNA质粒的3T3-L1前脂肪细胞相比,转染MH组IRS-1 shRNA质粒的3T3-L1前脂肪细胞IRS-1蛋白表达水平降低70%以上;而MH转染组细胞PPARγ蛋白的表达与前3组3T3-L1前脂肪细胞比较无改变.前3组3T3-L1前脂肪细胞诱导分化为成熟脂肪细胞成功,PPARγ蛋白的表达在脂肪细胞分化成熟过程中逐渐增高.油红O染色显示,随着脂肪细胞的分化成熟,桔红色脂滴逐渐增多;而转染MH组IRS-1 shRNA质粒的3T3-L1前脂肪细胞经诱导,油红O染色桔红色脂滴显着减少,直到分化的第8天,才见少许桔红色脂滴,且PPARγ蛋白的表达无变化.结论 IRS-1基因沉默后可抑制3T3-L1前脂肪细胞的分化,并在分化过程中抑制PPARγ的表达,说明IRS-1通过调节PPARγ的表达或与PPARγ共同作用在3T3-L1前脂肪细胞的分化中发挥决定性作用.
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文献信息
篇名
shRNA沉默IRS-1基因对鼠前脂肪细胞分化和PPARγ表达的影响
来源期刊
检验医学
学科
医学
关键词
胰岛素受体底物-1
脂质过氧化物酶体增殖物激活受体γ
RNA干扰
3T3-L1前脂肪细胞
年,卷(期)
2010,(8)
所属期刊栏目
研究方向
页码范围
596-600
页数
分类号
R446.1
字数
3809字
语种
中文
DOI
10.3969/j.issn.1673-8640.2010.08.005
五维指标
作者信息
序号
姓名
单位
发文数
被引次数
H指数
G指数
1
周后德
中南大学湘雅二医院内分泌研究所
30
203
7.0
13.0
2
唐玲丽
中南大学湘雅二医院检验科
27
134
8.0
10.0
3
唐爱国
中南大学湘雅二医院检验科
89
668
13.0
21.0
传播情况
被引次数趋势
(/次)
(/年)
引文网络
引文网络
二级参考文献
(0)
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参考文献
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节点文献
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1994(1)
参考文献(1)
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1995(1)
参考文献(1)
二级参考文献(0)
1998(1)
参考文献(1)
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2000(1)
参考文献(1)
二级参考文献(0)
2001(2)
参考文献(2)
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2004(2)
参考文献(2)
二级参考文献(0)
2010(0)
参考文献(0)
二级参考文献(0)
引证文献(0)
二级引证文献(0)
研究主题发展历程
节点文献
胰岛素受体底物-1
脂质过氧化物酶体增殖物激活受体γ
RNA干扰
3T3-L1前脂肪细胞
研究起点
研究来源
研究分支
研究去脉
引文网络交叉学科
相关学者/机构
期刊影响力
检验医学
主办单位:
上海市临床检验中心
出版周期:
月刊
ISSN:
1673-8640
CN:
31-1915/R
开本:
大16开
出版地:
上海市浦东新区洪山路528号
邮发代号:
创刊时间:
1986
语种:
chi
出版文献量(篇)
6132
总下载数(次)
14
总被引数(次)
40596
相关基金
国家自然科学基金
英文译名:
the National Natural Science Foundation of China
官方网址:
http://www.nsfc.gov.cn/
项目类型:
青年科学基金项目(面上项目)
学科类型:
数理科学
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