腺病毒载体介导Smad3基因在秦川牛前体脂肪细胞中的过表达和沉默

• 作者: 宁越 张乐 昝林森 李佩韦 王洪宝
• 来源期刊: 畜牧兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 秦川牛 Smad3基因 前体脂肪细胞 腺病毒载体
• 年，卷（期）: 2018,（9）
• 所属期刊栏目: 遗传育种
• 页码范围: 1840-1850
• 页数: 11页
• 分类号: S823.2
• 字数: 7746字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11843/j.issn.0366-6964.2018.09.005

摘要

旨在通过在秦川牛前体脂肪细胞中过表达和沉默Smad3基因,探讨其在秦川牛前体脂肪细胞分化过程中的生物学功能,从而为阐明TGF-β信号通路在牛脂肪组织生长发育过程中发挥的作用提供理论依据.本试验采用Ad5腺病毒改建的AdMaxTM重组腺病毒包装系统成功重组获得了过表达腺病毒pDC316-EGFP-bSMAD3和干扰腺病毒pDC316-EGFP-ShRNA-bSMAD3-1405.感染牛前体脂肪细胞后,利用实时荧光定量检测Smad3基因及脂肪形成相关基因mRNA的表达.结果表明,将获得的具有较高滴度的过表达腺病毒pDC316-EGFP-bSMAD3感染秦川牛前体脂肪细胞3、6、9d后,分别较对照组Smad3基因表达量显著上调了1 031、1 286、633倍(P＜0.001).与对照组相比,高滴度干扰腺病毒pDC316-EGFP-ShRNA-bSMAD3-1405感染牛前体脂肪细胞3、6、9d后,Smad3基因的表达量分别下调了70％、55％、57％(P＜0.o1).油红O染色和实时荧光定量结果均证明,Smad3基因抑制了前体脂肪细胞脂质积累并促使标志基因PPARγ、FABP4、C/EBPα和C/EBPβ的表达显著下调.综上所述,腺病毒载体介导体外表达载体可以成功的实现Smad3基因在秦川牛前体脂肪细胞中的过表达和沉默,并对秦川牛前体脂肪细胞的成脂分化具有一定的调控作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张乐	西北农林科技大学动物科技学院	12	72	4.0	8.0
2	宁越	西北农林科技大学动物科技学院	6	12	2.0	3.0
3	李佩韦	西北农林科技大学动物科技学院	4	4	2.0	2.0