小鼠白细胞介素15慢病毒载体的构建和表达

• 作者: 刘海燕 包光明 单琳 张胤晟 林丹丹 胡博 赵昀
• 来源期刊: 南通大学学报(医学版)
• 学科: 医学
• 关键词: 白细胞介素15 慢病毒载体 小鼠
• 年，卷（期）: 2010,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 79-82,85,封2
• 页数: 6页
• 分类号: R651.1+5
• 字数: 4229字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7887.2010.02.001

摘要

目的:克隆小鼠白细胞介素15(IL-15)基因,并构建可表达小鼠IL-15基因的重组慢病毒.方法:根据小鼠IL-15基因序列以及慢病毒穿梭载体相应的酶切位点设计合成PCR引物;提取小鼠脾脏总RNA,逆转录PCR扩增小鼠IL-15基因的编码区;克隆小鼠IL-15基因的编码区,并进行基因测序;构建含有IL-15基因的慢病毒穿梭质粒,并与其它包装质粒一起感染293T细胞;获得病毒颗粒并感染人慢性髓系白血病细胞MEG,Western Blot检测IL-15基因在MEG细胞中的表达.结果:含有小鼠IL-15基因编码区的慢病毒穿梭质粒构建成功,基因测序结果完全正确;含有小鼠IL-15基因的慢病毒载体包装成功;所得病毒上清可成功感染MEG细胞,流式细胞术检测阳性率可达98%;Western Blot结果证明小鼠IL-15基因在MEG细胞中正常表达.结论:成功扩增、克隆了小鼠IL-15基因,并建立其慢病毒表达系统.从而为后续的基础及应用研究工作奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	赵昀	苏州大学第一附属医院江苏省血液研究中心	6	9	2.0	2.0
2	刘海燕	苏州大学医学部肿瘤细胞与分子免疫学实验室	62	177	9.0	10.0
3	胡博	苏州大学医学部肿瘤细胞与分子免疫学实验室	9	14	2.0	3.0
4	林丹丹	苏州大学医学部肿瘤细胞与分子免疫学实验室	8	6	1.0	2.0
5	张胤晟	苏州大学医学部肿瘤细胞与分子免疫学实验室	3	5	1.0	2.0
6	包光明	苏州大学医学部肿瘤细胞与分子免疫学实验室	2	5	1.0	2.0
7	单琳	苏州大学医学部肿瘤细胞与分子免疫学实验室	2	5	1.0	2.0