人白细胞介素10基因慢病毒载体的构建及重组

• 作者: 白念岳 贺正华 郭曲练
• 来源期刊: 中国普通外科杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 慢病毒载体 人白细胞介素10 治疗,基因
• 年，卷（期）: 2008,（8）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 793-797
• 页数: 5页
• 分类号: R34-33
• 字数: 3944字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-6947.2008.08.015

摘要

目的 拟构建含人白细胞介素10(hIL-10)基因的慢病毒载体(LV-hIL-10),为进一步探讨慢性疼痛的治疗研究奠定基础.方法 从pCYIL-10质粒中选择适当的引物进行PCR后得到含Pme I 多功能酶切位点的IL-10 基因片段,将其构建到慢病毒载体pWPXL上得到重组的pWPXL- IL-10质粒,对所抽提的质粒进行酶切及测序检测正确后大量提取备用.将重组质粒pWPXL- IL-10、包膜质粒pMD2.G和包装质粒psPAX2共转染293T细胞后包装出复制缺陷的慢病毒颗粒,进行病毒滴度的测定.结果 重组质粒酶切鉴定结果显示,pWPXL- IL-10质粒中有一个530 bp左右的插入片断,大小与IL-l0 cDNA(534 bp)基本符合.测序结果显示pWPXL- IL-10质粒上插入片段的序列与基因库中hIL-10基因序列完全一致.转染后获得了高滴度(2×1010)、高纯度的病毒颗粒.结论 成功构建了含人白细胞介素10基因的慢病毒载体LV-hIL-10,为慢性疼痛治疗的研究奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	郭曲练	中南大学湘雅医院麻醉科	368	2456	21.0	34.0
2	贺正华	中南大学湘雅医院麻醉科	16	36	3.0	5.0
3	白念岳	中南大学湘雅医院麻醉科	32	231	10.0	14.0