瓦氏黄颡鱼卵黄脂磷蛋白(Lv)的纯化、性质鉴定及其抗血清的研制

• 作者: 刁晓明 权恒 李云 李育培 盛晓洒 翟旭亮
• 来源期刊: 水产学报
• 学科: 农学
• 关键词: 瓦氏黄颡鱼 卵黄脂磷蛋白 纯化 免疫分析
• 年，卷（期）: 2010,（1）
• 页码范围: 116-125
• 页数: 10页
• 分类号: TQ93|S917
• 语种: 中文
• DOI: 10.3724/SP.J.1231.2010.06428

摘要

采用凝胶过滤和离子交换两种层析技术,从瓦氏黄颡鱼Ⅳ期卵巢粗提液中分离、纯化出卵黄脂磷蛋白(Lv),采用糖、磷、脂蛋白染色技术验证分离、纯化的蛋白为Lv,该Lv在非变性条件下分子量约为230 ku,在SDS变性条件下分子量约为106 ku.纯化的瓦氏黄颡鱼Lv经检测显示含有类胡萝卜素,但没有二硫键,对热相对稳定.利用纯化的瓦氏黄颡鱼Lv,制备了兔抗瓦氏黄颡鱼Lv多克隆抗血清.通过双向免疫扩散法测得Lv抗血清的效价为1:32,还发现瓦氏黄颡鱼卵黄蛋白原(Vtg)和Lv之间有明显的免疫交叉反应性,说明两者具有相同的免疫原性;Western-blotting检测显示抗血清的特异性较好,并能特异性地识别Vtg.