体外无药物选择压力条件下HIV-1耐药基因突变的演变

• 作者: 刘思扬 刘永健 庄道民 李敬云 李林 李韩平 焦丽燕 王铮 耿庆茂 郭东星 鲍作义
• 来源期刊: 中华微生物学和免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 原代HIV-1耐药毒株 耐药突变 复制动力学
• 年，卷（期）: 2010,（5）
• 所属期刊栏目: HIV
• 页码范围: 431-437
• 分类号: R3
• 字数: 6448字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0254-5101.2010.05.011

摘要

目的 分离培养体外稳定传代的原代HIV-1耐药毒株,观察失去药物压力下,耐药毒株的体外生长以及主要耐药突变的演化趋势.方法 采集15例服用拉米夫定+司他夫定+萘韦拉平(3TC+D4T+NVP)的HIV-1感染者的外周血单个核细胞(PBMC),用体外共培养的方法从中分离原代HIV-1毒株;RT-PCR扩增耐药毒株历代培养上清的HIV-1 pol区基因并测序,在Stanford HIV Drug Resistance Database数据库进行耐药性分析.结果 15例患者中病毒载量>1000拷贝/ml的有8例,均成功分离出稳定传代的原代毒株,其中2株为耐药毒株,所携带的主要耐药突变分别是K103N/K238T和M184V/K103N/Y181C/H221Y,分别对NVP和3TC/NVP高度耐药;无药物压力的体外培养过程中,M184V、K103N、Y181C和H221Y等耐药突变可以稳定传代,但是K238T发生了回复突变.结论 分离出2株稳定传代的HIV-1耐药毒株,无药物压力情况下,携带K103N突变的毒株具有较好的复制适应性,可稳定传代;携带M184V和K103N/Y181C/H221Y的毒株也能够稳定复制;本研究中发现K238T耐药突变在失去药物的条件下稳定性差,提示该位点易发生回复突变.