健康人APOBEC3G基因的克隆及真核表达载体的构建与鉴定

• 作者: 史震 孔凡运 汤仁仙 甘宜敏 郑葵阳
• 来源期刊: 徐州医学院学报
• 学科: 医学
• 关键词: APOBEC3G 克隆 真核表达载体
• 年，卷（期）: 2010,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 219-222
• 分类号: Q789|R394.2
• 字数: 2586字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-2065.2010.04.003

摘要

目的 克隆人载脂蛋白B mRNA编辑酶催化多肽样3G(apolipoprotein B mRNA editing enzyme,catalytic polypeptide 3G,APOBEC3G)基因cDNA,构建APOBEC3G基因的真核表达载体,并在体外进行表达和鉴定.方法 采用RT-PER技术从健康人外周血单个核细胞中克隆APOBEC3G基因,将该基因插入pcDNA3.1真核表达载体,构建pcDNA3.1-A3G真核表达质粒,并利用脂质体将重组质粒pcDNA3.1-A3G转染HepG2和HL7702细胞,经免疫细胞化学、Western blot等方法检测APOBEC3G真核表达情况.结果 双酶切鉴定和测序结果表明,APOBEC3G真核表达载体构建成功.免疫细胞化学和Western blot结果均显示,转染pcDNA3.1-A3G的HepG2和HL7702细胞APOBEC3G蛋白均高表达,转染空质粒pcDNA3.1和未转染的HepG2和HL7702细胞APOBEC3G蛋白低表达或不表达.结论 成功构建了人载脂蛋白B mRNA编辑酶催化多肽样3G真核表达载体pcDNA3.1-A3G,为进一步研究APOBEC3G抗HBV作用奠定实验基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	郑葵阳	徐州医学院病原生物学教研室	74	215	8.0	10.0
2	汤仁仙	徐州医学院病原生物学教研室	74	220	8.0	11.0
3	史震	徐州医学院病原生物学教研室	14	33	3.0	5.0
4	甘宜敏	徐州医学院病原生物学教研室	5	3	1.0	1.0
5	孔凡运	徐州医学院病原生物学教研室	5	6	2.0	2.0