小葱植物内生链霉菌线型质粒pYY8L的端粒与复制区的克隆和鉴定

• 作者: 成秋香 杨勇 田新莉 覃重军 钟莉 陈振华
• 来源期刊: 微生物学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 链霉菌 线型质粒 端粒 复制
• 年，卷（期）: 2010,（4）
• 所属期刊栏目: 遗传和分子生物学
• 页码范围: 452-458
• 页数: 7页
• 分类号: Q933
• 语种: 中文

摘要

从小葱植物中分离到一株编号为36R-2-1B的链霉菌菌株,该菌株含有一个约为280 kb的线型质粒pYY8L.[目的]克隆、测序和分析pYY8L新的端粒和复制区.[方法]采用改良的"在凝胶中进行DNA碱处理与酶切"的方法来克隆大的线型质粒pYY8L的端粒,通过构建基因组柯斯文库和次级克隆的方法来缩小和鉴定pYY8L的复制区.[结果]在小葱植物内生链霉菌36R-2-1B中检测到约为280 kb的线型质粒pYY8L,克隆了pYY8L的端粒.其末端的152 bp包含6个小的回文序列,可以形成复杂的二级结构.利用柯斯文库构建、次级克隆和测序获得了4891 bp的pYY8L的复制区.该复制区含有6个基因,其中2个与天蓝色链霉菌线型质粒SCP1的复制基因非常相似,但是邻近的重复序列不同.[结论]采用新的改良的方法克隆和鉴定了pYY8L新的端粒和复制区.本文首次报道了植物内生链霉菌线型质粒的端粒和复制基因.