稳定转染Dicer基因对HELF细胞功能的影响

• 作者: 何琳 王禄增 郑志红
• 来源期刊: 中国比较医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: Dicer HELF 稳定转染
• 年，卷（期）: 2010,（4）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 50-55,后插4
• 页数: 7页
• 分类号: R-33
• 字数: 4389字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-7856.2010.04.012

摘要

目的 观察正常人胚肺成纤维细胞(HELF)在稳定转染Dicer基因后增殖能力及迁移能力的变化.方法 应用脂质体介导方法 转染Dicer基因表达载体于HELF细胞,G418筛选,PCR检测整合情况,RT-PCR检测表达情况,Western-blot检测蛋白表达水平,确定稳定转染细胞株,MTT方法 检测细胞增值能力,Transwell方法 检测细胞迁移能力.结果 Dicer基因稳定转染HELF细胞系建立,用RT-PCR和Western-blot方法 检测到Dicer基因mRNA和蛋白表达水平都明显增强.与转染空载体的HELF细胞相比,转染Dicer基因的HELF细胞48、72、96 h的MTT光吸收值明显升高(P＜0.05),并且穿过人工重构基底膜的细胞数明显增多.结论 Dicer基因稳定转染HELF细胞后,HELF细胞增殖能力和迁移能力都明显增强.