摘要:
[目的]分析桑ITS序列,为桑系统位置、进化关系、DNA指纹鉴别、育种亲本选择提供分子生物学依据.[方法]利用收集的73份桑资源,总DNA提取,PCR扩增,测序,并从GenBank下载桑科Moraceac,桑属Morus ITS序列,软件分析ITS长度、变异位点、G+C含量、遗传分歧.同源性百分比差异、系统位置与进化关系.[结果]获得ITS完整序列,基本序列全长576 bp,G+C含量59.55%.(ITS1:174 bp,G+C含量61.49%,ITS2:302 bp,G+C含量62.25%,5.8s:100 bp,G+C含量48.00%).序列比对表明,共166个变异位点,(ITS1:100,ITS2:66,5.8S:0),一些变异位点有明显的种性特征,可作为特异DNA指纹鉴别位点.最大遗传分歧4.0,山桑(M.bombycis)与其它栽培种遗传分歧0.9-1.4.基于ITS桑系统位置,在非洲硬木树(Milicia oxcelsa,MEU93585)与新西兰鹊肾树(Streblusglaber,DQ499105)之间,与非洲硬木树(MEU93585)亲缘关系最近.Mrbayes分析,新疆黑桑(M.nigra),北美默里桑(M.murryana,FJ605515)最原始,进化顺序为新疆黑桑,北美默里桑→白桑(M.alba)→华桑(M.cathayana)→长穗桑(M.wittiorum).[结论]ITS长度、G+C含量、变异位点均可作桑种质资源DNA特异指纹鉴别的依据,特别是碱基变异位点.桑属劳亚古陆(Laurasia)高纬度起源,由北向南迁移.桑属可由地理分布间接反映系统进化关系.