H3N2型猪流感病毒M2蛋白表达分析

• 作者: 刘超 史子学 彭丽娜 沈阳 王晓杜 罗金燕 邓绪芳 邱亚峰 陈培君 马志永
• 来源期刊: 生物工程学报
• 关键词: H3N2 猪流感病毒 M2蛋白 多克隆抗体
• 年，卷（期）: 2010,（1）
• 所属期刊栏目: 动物及兽医生物技术
• 页码范围: 16-21
• 语种: 中文

摘要

流感病毒的M2蛋白在流感病毒复制中起着重要作用,是抗流感病毒的靶标分子.本研究以提取的病毒基因组RNA作为模板,RT-PCR扩增H3N2亚型猪流感病毒M2基因,分别构建了重组原核表达载体和重组真核表达载体,建立了M2蛋白的原核和真核表达系统.通过大肠杆菌表达系统,制备了M2重组蛋白,并免疫大鼠制备了多克隆抗体.Western blotting和间接免疫荧光方法检测表明所制备的抗体能识别真核表达的M2蛋白和病毒感染细胞后表达M2蛋白,具有良好的特异性.重组M2真核表达载体转染Vero细胞,表达的重组M2蛋白大小为20kDa,定位于细胞浆中,与病毒感染细胞中的M2蛋白定位相同.Western blotting检测表明M2蛋白在病毒感染细胞12h后才能检出,晚于NS1,NP和M1,属于病毒复制的晚期蛋白,可作为病毒复制晚期的指示分子.本研究为弄清M2蛋白在病毒复制过程中的生物学功能奠定了基础.