小麦品种陕253新型avenin-like的克隆与原核表达分析

• 作者: 刘俊 庞红喜 李哲清 李敏 李艳亮 王明霞 董剑 赵万春 陈其皎 陈瑞佶 高翔
• 来源期刊: 中国农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: avenin-like 基因克隆 载体构建 融合蛋白 原核表达
• 年，卷（期）: 2010,（9）
• 所属期刊栏目: 研究简报
• 页码范围: 1954-1962
• 分类号: S5
• 语种: 中文
• DOI: 10.3864/j.issn.0578-1752.2010.09.024

摘要

[目的]克隆小麦品种陕253中的新型avenin-like(类燕麦储藏蛋白),并构建该基因的原核表达载体,在大肠杆菌中诱导表达融合蛋白.[方法]利用PCR方法从小麦品种陕253中克隆新型avenin-like,将克隆的avenin-like亚克隆至表达载体,经酶切及测序鉴定后,转化宿主菌Escherichia coli Rosetta-gami B(DE3),经IPTG诱导表达融合蛋白,并利用Westorn blot进行检测.[结果]从小麦品种陕253克隆获得3个新avenin-like,GenBank登录号分别为GQ903577、GQ903578和GQ903579.序列分析表明,其中GQ903579为假基因,利用所构建的大肠杆菌表达载体,经IPTG诱导,实现了对登录号为GQ903578的基因在原核系统的特异性表达.[结论]新型avenin-like的克隆及原核表达的成功,为小麦品质改良提供了研究基础.