鸭疫里默氏杆菌和大肠杆菌双型融合菌株的构建

• 作者: 刘燕 季权安 崔言顺 李建亮 王春平 肖琛闻 邵泽香 韦强 鲍国连
• 来源期刊: 中国兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 鸭疫里默氏杆菌 大肠杆菌 原生质体融合
• 年，卷（期）: 2010,（7）
• 页码范围: 903-907
• 分类号: S852.61
• 语种: 中文

摘要

以耐药标记的鸭疫里默氏杆菌TXRA1(Chlr,Erys)和大肠杆菌ZBO78(Eryr,Chls)作为亲本菌株,在Dnase Ⅰ始终存在的条件下,采用Lysozyme-EDTA法制备2菌株的原生质体,原生质体制备率分别达到了92.00%和91.94%,再生率分别达到了38.77%和37.29%.通过PEG法进行2菌株原生质体融合,成功获得31株具有双亲本耐药性(Chlr,Eryr)的融合菌株,并应用双重PCR方法对融合株的部分外膜蛋白A(ompA)基因进行扩增,其中有11株融合菌株能够表达2亲本的ompA基因,有20株仅表达亲本大肠杆菌的ompA基因.融合菌株的形态、染色特性和生化特性等介于2亲本菌株之间,连续传15代后融合菌株的上述性状仍能够稳定遗传.